2009年，ISO發(fā)布了ISO/TS 11059:2009，對奶與奶制品中嗜冷假單胞菌的計(jì)數(shù)方法進(jìn)行了描述，通過該方法，能夠?qū)Ξa(chǎn)色素和不產(chǎn)色素的嗜冷假單胞菌進(jìn)行分離。該標(biāo)準(zhǔn)也適合乳業(yè)的環(huán)境樣本。

乳業(yè)在我國發(fā)展迅速，而且品種豐富，包括液體奶（包括巴氏殺菌奶，超高溫奶）、酸乳、冰淇淋、果汁果味乳、雪糕、酸乳飲料、麥乳精等。其中液體奶

占主要部分，巴氏殺菌奶又占液體奶的主要部分。在巴氏殺菌奶中，常常有低溫菌的存在。低溫菌即嗜冷菌，能在7℃以下繁殖。當(dāng)冰箱中貯存的奶超過保存期，就會(huì)造成低溫菌的大量繁殖，引起產(chǎn)品變質(zhì)。乳被低溫菌污染被認(rèn)為是影響奶保質(zhì)期的為關(guān)鍵的因素。也就是說，耐冷假單胞菌被認(rèn)為是巴氏殺菌奶為重要的菌。

ISO/TS 11059:2009即是對耐冷假單胞菌的檢測和計(jì)數(shù)。其中分離假單胞菌的培養(yǎng)基推薦的是PPA平板，在25℃孵育48h，然后計(jì)數(shù)。保留菌落總數(shù)在150以下的平板，挑取5個(gè)菌落進(jìn)行純培養(yǎng)和驗(yàn)證試驗(yàn)。

驗(yàn)證試驗(yàn)包括氧化酶試驗(yàn)和葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)。氧化酶試驗(yàn)可使用氧化酶反應(yīng)試紙，加樣后如為陽性，則在5秒至30秒內(nèi)試紙變?yōu)樽霞t色。葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)可使用葡萄糖瓊脂，HiMedia貨號(hào)是M1589，配方和ISO*一致。假單胞菌為氧化酶試驗(yàn)陽性，葡萄糖發(fā)酵陰性。不過ISO也指出，某些假單胞菌菌株也可能在瓊脂表面產(chǎn)生黃色。

PPA培養(yǎng)基也可從HiMedia購買，貨號(hào)為M1788，品名為Penicillin and Pimaricin Pseudomonas Agar Base，配合兩個(gè)添加劑(貨號(hào)FD 264和FD 265) 一起使用。假單胞菌如需進(jìn)一步鑒定到種，可使用非發(fā)酵菌生化鑒定試劑盒（HiMedia貨號(hào)KB019），該試劑盒包含24種生化反應(yīng)，可鑒定的假單胞菌有19種。

HiMedia的假單胞菌顯色培養(yǎng)基和假單胞菌分離瓊脂同樣值得注意。前者品名為HiFluoro Pseudomonas HiVeg Agar Base，貨號(hào)是MV1469。該培養(yǎng)基含有特異性熒光劑，銅綠假單胞菌裂解熒光劑，從而紫外燈下發(fā)出熒光（下圖左面）。后者（貨號(hào)為M406）含有三氯生，一種廣譜抗菌劑，但假單胞菌對其耐受，可以生長。

HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商，一直致力于微生物培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn)，具有WHO GMP認(rèn)證、ISO9001：2008，ISO13485：2003認(rèn)證，CE認(rèn)證和FDA注冊登記。其產(chǎn)品行銷140多個(gè)國家。

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