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礦泉水中產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢測

更新時間:2019-07-18  |  點擊率:2007

產(chǎn)氣莢膜梭菌為厭氧型革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢的桿狀菌,廣泛分布于環(huán)境,在人的腸道內(nèi)也有發(fā)現(xiàn)。在自然界的大量水體中,產(chǎn)氣莢膜梭菌也存在,產(chǎn)生芽孢,并對污水處理措施和溫度具有抵抗力。產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量與水污染程度有一定的相關關系,因而也被認定是反映水質(zhì)的一種指示菌。我國《食品安全國家標準 飲用天然礦泉水檢驗方法》GB8538—2016規(guī)定,天然礦泉水產(chǎn)品和水源水需檢測產(chǎn)氣莢膜梭菌。在該國標中,的分離培養(yǎng)基為亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂(簡稱SPS),但早有文獻報道,用該培養(yǎng)基經(jīng)24h厭氧培養(yǎng)后產(chǎn)氣莢膜梭菌的黑色菌落產(chǎn)生不明顯,容易產(chǎn)生漏檢1。

 

上推薦的還有一款分離培養(yǎng)基為M-CP培養(yǎng)基。M-CP培養(yǎng)基初是由Bisson 和Cabelli兩個微生物學家描述的,用于快速鑒定海水、飲用水和污水中的產(chǎn)氣莢膜梭菌2。它被歐洲理事會指令98/83/EC中推薦用于人飲用水的水質(zhì)檢測,方法為膜過濾法3。

 

HiMedia生產(chǎn)的一款梭菌選擇性顯色培養(yǎng)基(貨號M1354)即M-CP培養(yǎng)基。M是膜過濾法的英文個字母,CP是產(chǎn)氣莢膜梭菌的英文簡稱。它用于水質(zhì)微生物檢測中,產(chǎn)氣莢膜梭菌的快速分離和初步鑒定。該培養(yǎng)基對于產(chǎn)氣莢膜梭菌具有更好的回收率,可用于監(jiān)測各種類型的水體,包括氯消毒過的水、工業(yè)廢水等。

 

培養(yǎng)基中的L-鹽酸半胱氨酸為還原劑,溴甲酚紫為pH指示劑。培養(yǎng)基中的吲哚β-D-葡萄糖苷為顯色底物,而二磷酸酚酞用于檢測酸性磷酸化酶。添加的D-環(huán)絲氨酸和多粘菌素B(FD153)抑制伴隨的其他菌群。用該培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)44 ± 1°C,21 ± 3小時即可觀察結(jié)果。當黃色菌落在暴露于氨煙30秒后變?yōu)槊倒寮t時,即可認為是產(chǎn)氣莢膜梭菌。還可挑取典型菌落和非典型菌落(綠色或未變色菌落)進行進一步的驗證。

 

 

 

M-CP培養(yǎng)基中所用的顯色劑吲哚β-D-葡萄糖苷濃度后來進行調(diào)整,濃度降低為60mg/L而不影響其靈敏度 4,這使得整個培養(yǎng)基的價格下降,因而能普遍使用。

 

HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養(yǎng)基和細胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn),具有WHO GMP認證、ISO9001:2008,ISO13485:2003認證,CE認證和FDA注冊登記,尤其通過CE的體外診斷注冊。其產(chǎn)品行銷140多個國家。

 

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參考文獻

 

1. 潘寶怡,等. 飲用天然礦泉水中產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測國標方法的改進. 現(xiàn)代食品科技.2012,28(9):1236

 

 

2. Bisson, J.W., and Cabelli, V.J., 1979, Membrane filter enumeration method for Clostridium perfringens: Applied and Environmental Microbiology, v. 37. . p. 55-66

 

3. E.U. (1998) 98/83/EC of Council of 3rd of November 1998 on the quality of water intended for human consumption. Off. J. Eur. Commun., L330, 32-54

 

4. Armon, R., and Payment, P., 1988, A modified m-CP medium for enumerating Clostridium perfringens from water samples: Canadian Journal of Microbiology, v.34. p.78-79.

 

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