2024年5月，《PLoS Pathog.》上發(fā)表論文：

“Serine protease Rv2569c facilitates transmission of Mycobacterium tuberculosis via disrupting the epithelial barrier by cleaving E-cadherin"

“絲氨酸蛋白酶Rv2569c通過(guò)切割e -鈣粘蛋白破壞上皮屏障，促進(jìn)結(jié)核分枝桿菌的傳播"

摘要：

上皮細(xì)胞是抵御病原體入侵的主要防線。然而，細(xì)菌病原體具有破壞這一屏障并促進(jìn)細(xì)菌遷移的能力。然而，結(jié)核分枝桿菌(M.tb)在這一過(guò)程中所采用的具體分子機(jī)制尚不清楚。在這里，科研人員通過(guò)評(píng)估Rv2569c切割e -鈣粘蛋白的能力來(lái)研究Rv2569c在結(jié)核分枝桿菌易位中的作用，e -鈣粘蛋白是細(xì)胞-細(xì)胞粘附連接的重要組成部分，在細(xì)菌入侵期間被破壞。利用在大腸桿菌中表達(dá)并通過(guò)親和層析純化的重組Rv2569c，科研人員證明了Rv2569c具有細(xì)胞壁相關(guān)絲氨酸蛋白酶活性。此外，Rv2569c能夠降解一系列蛋白質(zhì)底物，包括酪蛋白、纖維蛋白原、纖維連接蛋白和e -鈣粘蛋白?？蒲腥藛T還確定了Rv2569c蛋白酶活性的最佳條件是溫度為37℃，pH為9.0,MgCl2存在。為了研究Rv2569c在結(jié)核分枝桿菌中的功能，科研人員制備了Rv2569c的缺失突變體及其補(bǔ)充菌株，并將其用于感染A549細(xì)胞和小鼠。A549細(xì)胞感染實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Rv2569c具有裂解E-cadherin的能力，促進(jìn)M.tb通過(guò)極化的A549上皮細(xì)胞層遷移。此外，體內(nèi)感染實(shí)驗(yàn)表明，Rv2569c可以破壞E-cadherin，增強(qiáng)M.tb的定植，并在C57BL/6小鼠的肺部引起病理?yè)p傷?？傊?，這些結(jié)果強(qiáng)烈表明結(jié)核分枝桿菌利用絲氨酸蛋白酶Rv2569c破壞上皮防御，并通過(guò)跨越上皮屏障促進(jìn)其全身傳播。

在該研究中，對(duì)A549細(xì)胞的體外培養(yǎng)，用到了Ausbian進(jìn)口胎牛血清。